聚合酶链式反应过程(聚合酶链式反应的原理和过程)

王龙一 0
文章来源:王龙一

聚合酶链反应

polymerase chain reaction,PCR

定义:一种在体外扩增DNA片段的重要技术。当存在模板DNA、底物、上下游引物和耐热的DNA聚合酶时,经过多次“变性-复性-延伸反应”的循环过程,痕量模板DNA可扩增至几百万倍。

学科:生物化学与分子生物学_方法与技术

相关名词:甲基化特异性聚合酶链反应 阻抑聚合酶链反应 巢式聚合酶链反应

聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)可以非常有效、简便地体外扩增基因。利用PCR技术可以实现遗传物质的快速扩增,并且能够区分脱氧核糖核酸(DNA)序列和核糖核酸(RNA)序列。PCR在分子生物学研究之外也有广泛应用,如应用于癌症、感染和遗传疾病的诊断与研究。

PCR是体外酶促合成特异DNA片段的方法。每个PCR体系均包括4种主要成分:含有待扩增序列的DNA模板、引物(primer)、Taq DNA聚合酶(Taq DNA polymerase)和脱氧核糖核苷三磷酸(dNTP)。

PCR主要由高温变性、低温退火和适温延伸3个步骤反复的热循环构成。

与其他分子生物学技术相比,PCR具有效率高、敏感性高、特异性强、快速、简便等优点。毛发、血痕,甚至单个细胞的DNA即可通过PCR扩增进行检测。临床上常用于病原体DNA的检测、肿瘤微量残留细胞的检出、遗传病的基因诊断,法医学上嫌疑人或个体遗传物质的鉴定等。不足之处是需要严格的实验条件,如果使用不当,易有假阳性和假阴性。(审核:天津市中医药研究院附属医院检验科副主任技师 赵俊芳)


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